植物精油是成分眾多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的一類天然混合物,是天然中草藥成分中重要的活 性成分之一。植物精油具有抗菌消炎、抗病毒、抗癌抑瘤、抗氧化等多種生物學(xué)功能, 應(yīng)用范圍廣泛。本研究選擇百里香精油、牛至精油、艾葉精油和丁香精油進(jìn)行抗病毒活 性研究,并選擇精油中抗病毒活性較強(qiáng)的有效成分進(jìn)行的抗病毒機(jī)理研究,從而確定該活性成分的藥理作用,為精油抗病毒深入研究和藥物開發(fā)提供理論依據(jù)。
本研究選擇兩種常見的病 DNA 病毒人腺病毒(Human adenovirus,HAdV)和RNA 病毒腦心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)為研究模式病毒,利用 CPE 法和 MTT 法分別在其敏感細(xì)胞株 HEK293 和 Vero 上開展精油體外抗病毒活性研究,并 篩選出不同的精油對細(xì)胞的無毒濃度,通過不同精油對細(xì)胞感染病毒的保護(hù)作用、 治療作用、直接滅活作用以及抗病毒吸附細(xì)胞作用,確定精油抗病毒的作用機(jī)理,并利 用病毒滴度的變化來評估藥效。
研究結(jié)果表明:在對HAdV的研究中發(fā)現(xiàn),濃度為 20μL/L 的百里香精油在體外對 HAdV3 有一定的滅活作用,且其病毒滴度由 105.33TCID50/mL 下降到104TCID50/mL。牛至油濃度為 50μL/L 時,從 CPE 上可以看出其具有一定的保護(hù)作用,HAdV3 病毒滴度由 104.66TCID50/mL 下降到103.83TCID50/mL。對 EMCV 病毒進(jìn)行體外抗病毒活性研究,并利用CPE 法及熒光定量 PCR 方法來評價了精油抗病毒的效果。
結(jié)果表明:百里香精油在 25μL/L 到 100μL/L 的濃度范圍內(nèi)與陽性對照組相比較 48h 內(nèi) 未出現(xiàn)明顯的 CPE;牛至油組濃度在 0.78μL/L 到 12.5μL/L 的濃度范圍內(nèi) 48h 后細(xì)胞也未出現(xiàn)明顯的病變現(xiàn)象,病毒拷貝數(shù)有一定的降低。說明這兩種精油能推遲病毒感染細(xì)胞的時間。由于百里香精油、牛至油精油對兩種病毒都存在不同程度的抑制作用,所以繼續(xù)選擇這兩種精油中都含有的一種成分麝香草酚進(jìn)行有效成分的研究,通過以上相同的作用方式及評價方法,結(jié)果表明麝香草酚是百里香和牛至油抗人腺病毒的有效成分之一,而不是百里香精油抗 EMCV 的有效成分。
綜上所述,百里香精油、牛至油精油在體外能一定程度的滅活病毒和阻止病毒的吸 附,研究結(jié)果為今后進(jìn)一步研究植物精油抗病毒提供理論基礎(chǔ)。
文章原作:蘭州交通大學(xué) 羅彩霞
文章摘自:中醫(yī)藥學(xué)報